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再获权威认可！pg电子官网荣获毒性病理形态学检查能力验证优秀证书

上海pg电子官网生物医药股份有限公司全资子公司pg电子官网普亚医药科技（上海）有限公司和南汇园区在中国食品药品检定研究院组织的2024年度毒性病理形态学检查能力验证项目（NIFDC-PT-478）中，均获得“优秀”评价。这不仅是对pg电子官网在病理学研究领域专业实力的权威认可，也是对持续创新和质量管控的肯定。

2024-11-28行业资讯

自免药物研发：选择合适的动物模型得牢记这五点

pg电子官网在临床前研究领域拥有20年的经验，创建了丰富完善的动物模型库。pg电子官网云讲堂邀请药效部项目经理袁云云博士为您解答，在自免药物研发中，关于动物模型选择的那些困惑。

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转化医学研究

pg电子官网转化医学平台拥有经验丰富的专业化技术团队，从药物靶点的作用机制和生物标志物的临床应用出发，以生物标志物的发现和验证为基础，结合多种不同的技术平台和先进的仪器，创建了多种生物分析方法，降低了药物研发的成本和时间，为不同类型的药物、不同类型的药企和不同研发阶段的项目提供多元高效的服务。

转化医学以药物研发过程中生物标志物为核心，以精准医疗提高药物研发临床应答率为目标，覆盖从早期靶点确认——临床前R&D ——临床I、II、III期Development，到上市后的药物检测，通过不同阶段的研究实现药物研发的闭环。
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  CMC研究
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  上市
随着基因组学、蛋白质组学和代谢组学等多组学分析技术不断地发展，治疗方式已经从传统小分子扩展到多肽、蛋白、抗体、基因疗法、细胞疗法等多种新型技术。尽管有这些新技术，但仍有大量疾病的致病原因还无法彻底明白。
转化医学将生物医学观察和研究转化为改善健康的干预措施的过程，加速了基础研究、新药开发的和临床转化的进程，成为精准靶向治疗的加速器。转化医学研究利用各种研究手段，确定靶点与疾病发生发展的关系、验证和探索药物的作用机制、发现生物标志物并开发伴随诊断产品，以及为临床研究开展筛选最合适的人群和适应症等，从而提高新药研发效率和成功率。
将转化医学里程碑叠加到药物开发阶段^[1]
pg电子官网请回答：什么是转化医学

服务平台

细胞因子和生物标志物检测

pg电子官网可以为广大医药研发人员提供细胞因子及生物标志物的检测服务，其生物分析部基础设施齐全、仪器设备先进，拥有的流式CBA、MSD、Luminex系统等高端技术平台可以进行各种single plex或multiplex多形式的细胞因子和生物标志物的检测。

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生物分析技术服务平台

pg电子官网生物分析部可以为客户提供小分子药物、大分子生物制品、生物标志物的筛选与开发，以及临床前和临床阶段的研究服务。可以提供符合FDA/NMPA GLP的生物技术药物生物分析服务，以支持蛋白药物、抗体药物、疫苗、生物标志物、细胞和基因治疗药物的早期开发，及其临床前研究和临床研究。

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流式细胞技术平台

截至目前，pg电子官网承接的流式检测项目已经近400项，包括细胞表面抗原表达的流式检测；细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡等的流式分析；动物外周血及各免疫器官检测；移植瘤模型流式检测等。

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免疫组化技术平台

免疫组化简介
免疫组化，也称免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。是指应用免疫学基本原理即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究。根据抗原抗体反应和化学显色的原理，组织切片或细胞样本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与二抗反应，DAB进行显色，进而进行分析。
主要步骤
组织处理、固定、切片抗原修复除去内源性过氧化物酶封闭一抗、二抗孵育检测复染

组织处理、固定、切片

组织固定可保存抗原，防止采集的组织自溶和坏死。组织包埋可在切片过程中对组织提供支撑，使切片更坚实。

	石蜡切片	冰冻切片
固定	包埋前：甲醛	切片前或切片后：甲醛、甲醇、乙醇或丙酮
切片	切片机	冰冻切片机
储存	室温下储存多年	-80 °C下储存1年（-190°C下储存时间更长）
优势	容易操作，不会损坏切片	♦ 保留酶的功能和抗原性 ♦ 实验流程简短（通常不需要冗长的固定步骤）
局限性	♦ 过度固定会掩盖抗原表位，进而增加抗原修复的需求 ♦ 处理时间长：在梯度酒精和二甲苯中逐步脱水，以便于石蜡渗透。	♦ 如果没有快速冷冻组织”可能会形成冰晶，从而破坏组织结构 ♦ 冰冻切片通常比石蜡切片厚，可能会导致分辨率低、图像差 ♦ 可能需要阻断内源活性酶。

石蜡切片 vs冰冻切片

处理流程

抗原修复

对甲醛固定的组织切片进行抗原修复，以暴露抗原位点，从而使抗体结合。

	热诱导的抗原表位修复	蛋白水解酶诱导的抗原表位修复
优势	抗原表位的修复更温和，参数更可控。	适用于较难修复的抗原表位。
ph值	通常使用pH6的缓冲液，但碱性缓冲液也在广泛使用。必须通过实验确定	pH值通常为7.4。
温度	约95°C。	通常为37°C
孵育时间	10-20分钟	10-15分钟
缓冲液组分	取决于靶抗原所需的pH 值。常用的缓冲液包括柠檬酸钠、EDTA和Tris-EDTA	酶(如胃蛋白酶、蛋白酶K 或胰蛋白酶)的中性缓冲液。
注意事项	微波炉加热可能会导致抗原修复不均匀。剧烈沸腾会导致脱片(组织与载玻片分离）。	酶修复有时会破坏切片的形态- 浓度和时间需要优化

抗原修复的主要方法

封闭
用血清或BSA封闭，防止抗体的非特异性结合，并降低背景和潜在的假阳性结果。
❖ 蛋白封闭：使用血清或BSA 进行封闭对于防止抗体与组织或Fc 受体（与抗体恒定区（Fc）结合的受体）发生非特异性结合至关重要。二抗种属来源的血清是很好的封闭试剂。使用牛血清白蛋白（BSA）或酪蛋白，可用于阻断非特异性抗体结合。
❖ 生物素封闭：在使用基于亲和素/生物素的检测系统时，阻断内源性生物素，因为内源性生物素存在于许多组织中，特别是肾脏、脾脏、肝脏和大脑中。用亲和素与组织孵育，阻断内源生物素，然后用外源生物素孵育，以阻断亲和素分子上额外的生物素结合位点。
检测
❖ 酶显色法：显色检测使用酶能够催化可溶性底物产生有色沉淀。这些酶通常偶联在二抗上，也可以偶联在一抗上用于直接检测。最常用的酶有HRP 和AP，前者将DAB 转化成棕色产物，后者将3-氨基-9-乙基咔唑 (AEC) 转化成红色产物。显色检测通常比荧光检测更灵敏。此外，不同于荧光染料，有色沉淀物有光稳定性，因此染色切片能够保存多年。荧光检测需要使用专业荧光显微镜和滤光片，显色检测仅需使用标准显微镜。然而，显色检测的孵育和封闭步骤比荧光法更多，时间也更长。
❖ 荧光法：荧光检测（免疫荧光）是基于荧光基团被特定波长的光激发后发射波长较长的荧光的特性。荧光检测常常用于需要同时检测多种抗原的情况。荧光染料可以与一抗或二抗直接偶联，也可与链霉素亲和素偶联。
案例赏析：PD-L1, Ki-67, Her2, CD31, CD163, FoxP3
IHC Analysis of the expression of
a)PD-L1 from lung adenocarcinoma^[3]; b)Ki-67 from periampullary tumors^[4]; c)Her2 from lung tumor^[5]; d)CD31 from human gastric adenocarcinoma^[6]; e)CD163 (M2 TAM marker) from oral squamous cell carcinoma (OSCC)^[7]; f)FoxP3 from human glioblastoma^[8].

总结与展望

基于基因组学、蛋白组学、细胞组学及病理组学等综合性转化医学平台；高质量的研发管理团队；pg电子官网转化医学平台致力于为全球合作伙伴提供全方位生物标志物发现、靶点验证、伴随诊断开发与商业化检测等一体化解决方案。
❖ 以ELISA、ECL（MSD), SIMOA（HD-X), Biacore 8K 技术构建的的蛋白质相互作用，蛋白水平生物标志物平台；
❖ 以流式细胞术（BD Symphony A3，BD Fortesssa, Beckman CytoFLEX S）为主构建的细胞水平生物标志物平台；
❖ 以荧光定量PCR技术构建的多重核酸水平生物标志物平台；
❖ 免疫组化（TAMs-IHC，FISH）技术构建的病理水平生物标志物平台等。

参考文献：
[1] Hugues Dolgos, et al. Translational Medicine Guide transforms drug development processes: the recent Merck experience. Drug Discov Today. 2016 Mar;21(3):517-26. doi: 10.1016/j.drudis.2016.01.003.
[2] Ying Xu, et al. A Selective Small-Molecule c-Myc Degrader Potently Regresses Lethal c-Myc Overexpressing Tumors. Adv Sci (Weinh). 2022 Mar;9(8):e2104344. doi: 10.1002/advs.202104344.
[3] Jonas J Heymann, et al. PD-L1 expression in non-small cell lung carcinoma: Comparison among cytology, small biopsy, and surgical resection specimens. Cancer Cytopathol. 2017 Dec;125(12):896-907. doi: 10.1002/cncy.21937.
[4] Mark M Aloysius, et al. Predictive value of tumor proliferative indices in periampullary cancers: Ki-67, mitotic activity index (MI) and volume corrected mitotic index (M/V) using tissue microarrays. World J Surg. 2010 Sep;34(9):2115-21. doi: 10.1007/s00268-010-0681-3.
[5] Montse Verdu, et al. Cross-reactivity of EGFR mutation-specific immunohistochemistry assay in HER2-positive tumors. Appl Immunohistochem Mol Morphol. 2015 Sep;23(8):565-70.
[6] Qingling Wang, et al. EPCR promotes MGC803 human gastric cancer cell tumor angiogenesis in vitro through activating ERK1/2 and AKT in a PAR1-dependent manner. Oncol Lett. 2018 Aug;16(2):1565-1570. doi: 10.3892/ol.2018.8869.
[7] Faustino J Suárez-Sánchez, et al. Macrophages in Oral Carcinomas: Relationship with Cancer Stem Cell Markers and PD-L1 Expression. Cancers (Basel) (IF: 6.13; Q1). 2020 Jul 2;12(7):1764. doi: 10.3390/cancers12071764.
[8] Qi Yue, et al. The prognostic value of Foxp3+ tumor-infiltrating lymphocytes in patients with glioblastoma. J Neurooncol. 2014 Jan;116(2):251-9. doi: 10.1007/s11060-013-1314-0. Epub 2013 Nov 26.[9] Christopher P Austin.Opportunities and challenges in translational science. Clin Transl Sci. 2021 Sep;14(5):1629-1647. doi: 10.1111/cts.13055.

FAQs

流式细胞术

流式细胞术(Flow Cytometry,简称FCM)是一种可以快速,准确,客观,并且能够同时检测快速直线流动状态中的单个细胞的多项物理及生物学特征,加以分析定量的技术,同时可以对特定群体加以分选。
流式细胞仪(Flow Cytometer)集激光技术,电子物理技术,光电测量技术,电子计算机技术,细胞荧光化学技术,单克隆抗体技术为一体的一种新型高科技仪器。
流式细胞仪的优势

• 测速度快,分析样本量大
在极短时间内可分析大量细胞,这是流式不同于其他细胞分析仪器的主要特点,可以每秒钟上万个细胞的速率进行测量。
• 可同时分析单个细胞的多种特征
使用不同荧光素标记的单克隆抗体或者荧光染料对细胞进行荧光染色,通过流式细胞分析,可获得单细胞的多种信息。
• 可检测的样本种类多样
各种细胞(如外周血,骨髓,细针穿刺,灌洗液,实体组织,悬浮或贴壁培养的细胞),微生物,人工合成微球。